1.1 試驗材料 糞腸球菌制劑由思科福(北京)生物科技有限公司提供,有效活菌數≥1.0×1010CFU/g; 氧化鋅為市購,純度為75%。 1.2試驗日糧 試驗基礎日糧按照NRC(1998)配制,飼糧配方及營養水平見表1。1材料與方法
注:每千克預混料為配合飼料提供The premix provides following per kg diet:VA 10000 IU,VD3 4000 IU,VE 40 IU, VK3 8 mg,VB1 13.72 mg,VB2 6.2 mg,VB12 0.02 mg,煙酸nicotinic acid 22 mg,D-泛酸pantothenic acid 12 mg,生物素biotin 0.2 mg,膽堿 choline 800 mg,鎂 Mg 0.06 mg,鐵Fe (硫酸亞鐵as ferrous sulfate) 70mg,銅Cu(堿式氯化銅as Basic copper chloride)100 mg,錳Mn20 mg,碘I1.28 mg,鋅Zn (硫酸鋅和氧化鋅as zinc sulfate andZinc oxide) 2200 mg,硒Se 1.31 mg。
1.3 試驗設計和方法
本試驗采用單因子設計,選擇平均體重7.39±0.28kg保育期仔豬80頭,按性別比例相同的原則隨機分為對照組和試驗組,每組設4個重復,每個重復10頭豬。對照組日糧:基礎日糧+3000 g/t氧化鋅,試驗組日糧:基礎日糧+2000 g/t氧化鋅+100 g/t糞腸球菌制劑(有效活菌數1.0×1010 CFU/g)。預飼期為6d,試驗期為30 d,至保育期結束。
1.3 飼養管理
試驗在北京房山區某豬場進行。在同一豬舍內飼養,記錄編號。豬舍采用封閉式,轉群前進行全面刷洗、消毒,然后進豬。采取旋轉式喂料器自由采食,鴨嘴式自動飲水器供水,飼養管理方法和環境條件一致,按豬場的常規程序進行驅蟲防疫。
1.4 檢測指標和測定方法
試驗在北京房山區某豬場進行。在同一豬舍內飼養,記錄編號。豬舍采用封閉式,轉群前進行全面刷洗、消毒,然后進豬。采取旋轉式喂料器自由采食,鴨嘴式自動飲水器供水,飼養管理方法和環境條件一致,按豬場的常規程序進行驅蟲防疫。
1.5.1 生長性能的測定
試驗開始第一天和最后一天清晨對保育豬進行稱重,稱重前要空腹12 h左右,測定各重復保育豬初重和末重,計算日增重。
記錄各重復投料量及剩料量,以計算平均日采食量及料肉比。
1.5.2 腹瀉率的測定
記錄每天每重復的腹瀉次數,計算腹瀉率。
腹瀉率=試驗期內累計腹瀉頭日數/(試驗天數×試驗頭數)×100%。
1.5.3 皮毛評分
選擇豬場經驗豐富的兩人對各重復保育豬的皮膚情況進行評分,取兩人的平均值作為該重復的最終評分,評分標準見表3。
1.6 統計分析
所有數據采用 SPSS16.0軟件進行方差分析,P≤0.05時確定為差異顯著,文中所有數據均以“平均值±標準誤”表示。
2.1 糞腸球菌部分替代氧化鋅后對保育豬生長性能及腹瀉率的影響
從表4可知,在保育豬日糧中用100g/t 糞腸球菌制劑替代1000 g/t 的氧化鋅后,對保育豬的平均日增重、日采食量、料肉比及腹瀉率的影響雖均不顯著(P<0.05),但可以看出試驗組的平均日增重和平均日采食量與對照組相比,均有提升的趨勢(平均日增重從350 g/d提高至369g/d,平均日采食量提高17.26 g)。而從料肉比指標來看,下降的趨勢更加明顯(P=0.172),與對照組相比降低0.04。可見添加100 g/t 的糞腸球菌制劑去替代保育豬日糧中1000g/t 的氧化鋅,在仔豬腹瀉率沒有顯著變化的情況下,對此階段保育豬的生長性能沒有顯著不良影響,反而有一定的改善趨勢,證明了在生產中的可行性,也為下一步全部代替氧化鋅奠定了實踐基礎。
2.2 糞腸球菌部分替代氧化鋅后對保育豬皮毛評分的影響
由表5可知,在保育豬日糧中用100 g/t 糞腸球菌制劑替代1000g/t 的氧化鋅后,對保育豬的皮膚紅潤程度、毛色亮度和毛色凌亂等級的評分影響在統計學分析上雖不顯著(P<0.05),但可以看出試驗組皮毛評分與對照組相比,三項指標均有提高的趨勢。可見用100g/t 的糞腸球菌制劑去替代保育豬日糧中1000 g/t 的氧化鋅,對于生產中消除氧化鋅造成保育豬皮白毛長的不良影響,改善豬只皮毛外觀,有較好的指導意義。
3.1 氧化鋅對斷奶仔豬生長性能的影響及其機理
添加高水平的氧化鋅可以促進仔豬的生長,國內外已有諸多報道。一般來說,這可能與鋅促進舌黏膜味蕾細胞的再生有關,鋅可以增加味蕾對味覺的敏感性,提升食欲;再者鋅的添加也可以提高唾液中的堿性磷酸酶和胰腺中的羧肽酶A的活性(兩酶均是含鋅酶),從而提高仔豬采食量。趙昕紅等(1999)報道高劑量的氧化鋅有很好的抗腹瀉效果,其機理很可能與其藥理作用相關,高劑量的鋅能夠提高蛋雞抗體滴度,鋅離子可以通過抑制大腸桿菌的呼吸鏈作用而降低其數量和危害性;另外,研究表明,高劑量的氧化鋅能抑制斷奶應激造成的仔豬腸黏膜通透性的增加,防止或減少仔豬飼料抗原或病原物質被吸收,但此機制是通過抑制細菌在腸道粘膜的粘附,阻止上皮細胞滲透性的提高實現的,并不能說明氧化鋅具有抗菌活性;第三,氧化鋅可能會降低腸上皮細胞中肥大細胞數量及其分泌物的量,從而降低斷奶仔豬腹瀉程度和腹瀉時間。
盡管氧化鋅具有較好的抗腹瀉效果,但長期應用高鋅會導致諸多不良后果。筆者認為,氧化鋅能夠減少仔豬腹瀉的作用機理至今還未十分明確,很可能由于氧化鋅具有某種藥物機理,高劑量的鋅使得某些營養素在體內代謝發生紊亂,目前明確的是高鋅能夠造成微量元素在體內吸收的不平衡。微量元素之間存在著相互作用,某種微量元素含量過高,將會拮抗其他微量元素的吸收,進而導致缺乏。銅、鋅、鐵三者之間存在拮抗作用,高鋅日糧會使得銅、鐵及其他微量元素的利用率降低,誘發缺鐵,進而引起一系列病理性或代謝性的疾病,經長期積累,表現為皮膚病增多,例如廣大用戶反映的保育豬毛長、皮膚蒼白無光澤且紅潤度差的問題。再者,飼料中礦物質過多,必將對維生素的穩定性產生負面影響,導致維生素的缺乏。第三,應用高劑量鋅會降低其他營養素的吸收利用,造成消化機能紊亂等等,抑制生長,這就是為什么廣大用戶會發現在控制住腹瀉的一段時間斷奶仔豬會有一個短暫的促進生長現象,而后出現豬只的后期長勢受到明顯影響的原因。最后,高劑量的使用鋅導致糞便鋅大量排放,給環境造成的污染日趨嚴重,且會沉積在畜產品內,對人類健康構成潛在威脅。所以使得越來越多的研究者關注于尋找氧化鋅的代替品,微生態制劑具有獨特地腸道菌群調節作用來促進生長、控制幼小動物的腹瀉,并因綠色、無污染、無殘留并備受好評,微生態制劑中應用效果最為明顯就是乳酸菌制劑,故本研究選取乳酸菌制劑作為氧化鋅的替代品。
3.2 糞腸球菌制劑對斷奶仔豬生長性能的影響及其機理
微生態制劑是近幾年的熱點話題,乳酸菌因其對環境的抗逆性差無法像芽孢桿菌那樣廣泛應用,最近報道經特殊包被工藝可使乳酸菌活性大大提高。本試驗所使用的糞腸球菌制劑就是經過此特殊包被工藝制成。糞腸球菌是乳酸菌的一種,是動物腸道的常在菌,它們能夠在腸道內短時間內迅速繁殖,調節腸道微生態平衡,同時產生生理乳酸和短鏈脂肪酸,在腸道水平上殺菌抑菌,研究證明糞腸球菌是進入動物腸道上段可迅速進行新陳代謝的營養型細菌,其代謝產物具有很強的蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶的活性,同時還有降解植物飼料中復雜碳水化合物的酶類,均助于飼料的消化利用。
斷奶階段是豬只生長過程中的一個重要基礎階段,由于此階段消化道發育尚不完善,由日糧、營養及內外環境等因素的改變而帶來的應激會破壞仔豬消化道正常菌群的平衡,降低飼料消化率,提高腹瀉發病率,從而影響商品豬料重比、出欄時間及出欄重。在仔豬斷奶階段使用活菌制劑能夠競爭性地排斥有害微生物,這樣對腸道微生物菌群平衡、腸道上皮細胞的完整性和內分泌系統的功能就能起到積極作用。華均超等(2012)研究發現含有腸球菌的復合制劑能顯著提高仔豬的平均日采食量和降低料重比,試驗全期仔豬的腹瀉率優于對照組。Taras等(2006)給仔豬飼喂腸球菌后,腹瀉率由38%降至21%,Zeyner和Boldt(2006)在仔豬從出生到斷奶期間口服腸球菌制劑,其腹瀉的發生率大大降低(40% VS 14.8%),平均每天增重比對照組多出17 g。Ulrike等(2006)發現添加腸球菌增加小腸上皮對葡萄糖的吸收,這解釋腸球菌促進動物生長的一種原因。周緒霞等(2008)研究發現糞腸球菌明顯提高仔豬日增重(11.46%),降低料肉比(6.20%),血中白蛋白、C3、C4、IgA、IgG水平均有明顯提高,且日糧中添加 2×105 CFU/g的糞腸球菌可使仔豬糞便中沙門氏菌和大腸桿菌數量分別降低了15.37%和11.79%,乳酸菌數量增加18.78%,證實了糞腸球菌可通過提高斷奶仔豬特異和非特性免疫、改善腸道微生物菌群組成,達到促生長性能的作用。溫建新等(2008)在肉雞試驗上證明糞腸球菌可以提高肉雞的體增重,在抗DNV的HI效價、免疫器官指數方面作用明顯,說明它促進免疫器官發育,明顯提高循環抗體的水平。史同瑞等(2008)研究糞腸球菌在體外拮抗雞致病性大腸桿菌的機理中發現,產生拮抗作用主要是由于該菌能發酵葡萄糖產酸從而抑制大腸埃希氏菌。徐耀基等(1998)從患有子宮內膜炎的奶牛體內分離出6 種致病菌(溶血性鏈球菌、埃希氏大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、克雷伯氏菌、變形桿菌、綠膿桿菌),將其分別與糞腸球菌混合培養,結果觀察到糞腸球菌對上述致病菌均存在抑制作用。Takeshi等(2009)給犢牛口服糞腸球菌制劑后,可以提高IgA的水平并刺激腸粘膜免疫,說明了糞腸球菌可以調節腸道免疫系統,從而降低腹瀉等疾病的發生率。另外,Capcarova1等(2010)通過飲水方式為肉仔雞添加腸球菌,可以提高血清鈣和血清鐵的濃度,減少甘油三酯的含量,而鐵與血紅蛋白的形成有關,血紅蛋白又是皮膚紅潤與否的一個重要因子,筆者認為這可能從另一方面解釋了糞腸球菌制劑為何能夠改善保育豬的皮毛情況。
本試驗研究結果表明:使用100g/t 的糞腸球菌制劑去替代保育豬日糧中1000 g/t 的氧化鋅,對保育豬的生長性能和腹瀉率并沒有顯著的不良影響,而對提高日增重和采食量,降低料肉比,改善豬只皮毛狀況有一定的趨勢,在生產中具在一定的指導意義,并為下一步糞腸球菌制劑全部代替氧化鋅的可行性研究提供依據。
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責編:馬維軍;審閱:陳達
(來源:思科福供稿;作者:張冬梅,劉影)