作者：龍芳芳、朱寶生(云南省第一人民醫(yī)院遺傳診斷中心)
來源：重慶圍產(chǎn)
我國出生缺陷發(fā)生率與世界中等收入國家的平均水平接近，占新生嬰兒的5.6%，但由于人口基數(shù)大，每年新增出生缺陷病例總數(shù)龐大，全國每年新增出生缺陷約90萬例。全國累計有近3000萬個家庭曾生育過出生缺陷和先天殘疾兒，約占全國家庭總數(shù)的近1/10。染色體非整倍體是造成出生缺陷的主要原因之一，其中21-三體、18-三體、13-三體較為常見。21-三體綜合征（又稱為唐氏綜合征，Down’s syndrome或先天愚型）最為常見，新生兒中發(fā)病率大約為1/600~1/800，且隨著母親年齡的增長有顯著上升趨勢。患兒通常都存在學(xué)習(xí)障礙、智能障礙或伴有臟器畸形等問題。18-三體綜合征（又稱為愛德華氏綜合征）是僅次于唐氏綜合征的第二種常見染色體三體征，新生兒中發(fā)病率為1/8000~1/3500。主要表現(xiàn)為發(fā)育遲緩、智能障礙和嚴(yán)重先心病等多發(fā)畸形，患兒多于出生后數(shù)周死亡。13-三體綜合征（又稱為Patau綜合征），新生兒中發(fā)病率約為1/25000。具有嚴(yán)重智力發(fā)育障礙，全前腦畸形，嚴(yán)重先心病，多指（趾），嚴(yán)重唇腭裂，多囊腎及多囊肝等異常。存活較久的患兒還有癲癇樣發(fā)作，肌張力低下等。在這類遺傳病中，胎兒期常有流產(chǎn)、死胎、畸胎等，患兒可表現(xiàn)為先天智力低下、生長發(fā)育遲緩，常伴有五官、四肢、內(nèi)臟等方面的畸形，生活自理困難，給家庭和社會造成沉重的經(jīng)濟負擔(dān)。
無創(chuàng)產(chǎn)前檢測
研究表明13、18、21-三體綜合征及X，Y染色體非整倍體占新生兒染色體數(shù)目異常的95%。對于這些疾病尚無有效的治療方法，唯一有效的措施是廣泛開展產(chǎn)前篩查與診斷，及時診斷胎兒異常，適時終止妊娠，防止畸形兒出生，是降低出生缺陷的重要手段。研究發(fā)現(xiàn)在孕婦外周血中存在胎兒游離DNA、游離RNA、胎兒有核紅細胞、甲基化標(biāo)記位點的胎盤特異性DNA等。胎兒游離DNA中包括約90~95%母體自身凋亡DNA片段和約5~10%胎兒游離DNA，經(jīng)過DNA萃取和測序前處理等方式，使得母親外周血中的DNA能在大規(guī)模并行基因組測序平臺進行堿基信息讀取。在得到300~500萬個有效DNA序列信息后，基于懷有正常二倍體胎兒的孕婦群體數(shù)據(jù)構(gòu)建正態(tài)分布模型，以確定懷有二倍體胎兒的置信區(qū)間，統(tǒng)計得到懷有二倍體胎兒的檢測閾值，從而對受檢樣本是否懷有染色體非整倍體胎兒做無創(chuàng)產(chǎn)前檢測（Noninvasive prenatal test，NIPT）胎兒染色體異常技術(shù)的出現(xiàn)，是產(chǎn)前檢測技術(shù)的一大突破。該技術(shù)僅需抽取3~5 mL的母體外周血，即可檢測胎兒是否存在染色體非整倍性異常。母體外周血中胎兒游離DNA含量相對較高，提取及分析過程簡單，易于發(fā)展為可應(yīng)用于臨床的大樣本高通量的檢測方法。另外，胎兒DNA在孕早期就可檢測到，且分娩后很快被清除，不會受前次妊娠的影響。因此，對孕婦外周血中胎兒游離DNA的檢測及其臨床應(yīng)用研究將對無創(chuàng)性產(chǎn)前診斷技術(shù)的發(fā)展產(chǎn)生重大影響。該技術(shù)基于新一代高通量測序技術(shù)及生物信息學(xué)分析方法，具有無創(chuàng)、早期、高通量和高準(zhǔn)確性。現(xiàn)階段對21-三體綜合征和18-三體綜合征的檢出率可以達到100%，特異性為97.9~99.7%。對其它的常染色體及性染色體數(shù)目異常的檢出率雖不及以上二種病，但是克服了傳統(tǒng)的血清學(xué)篩查技術(shù)不能篩查的困難。隨著測序深度的增加和生物信息分析能力的提升，該技術(shù)還可以用于很多疾病的檢測。例如，可能檢測胎兒的某些染色體片段缺失和重復(fù)；可以檢測胎兒Rh血型（父系基因型）；可能檢測胎兒某些單基因遺傳病（父系基因突變），輔助臨床診斷。
經(jīng)過近年的臨床試驗，目前對無創(chuàng)產(chǎn)前檢測（NIPT）胎兒染色體非整倍體在臨床應(yīng)用的適應(yīng)征為：血清學(xué)篩查唐氏綜合征高風(fēng)險或18-三體綜合征高風(fēng)險及臨界高風(fēng)險（風(fēng)險率在1/1000～1/270）的孕婦；主動要求直接用該技術(shù)進行篩查的孕婦（出生衛(wèi)生對經(jīng)濟學(xué)的考慮，在目前的價格條件下醫(yī)生不可以推薦用NIPT做一線篩查）；拒絕介入性產(chǎn)前診斷的篩查高風(fēng)險孕婦，包括高齡孕婦、血清學(xué)篩查高風(fēng)險，在知情后拒絕介入性產(chǎn)前診斷技術(shù)的孕婦，以及對介入性產(chǎn)前診斷極度焦慮的孕婦；無產(chǎn)前診斷機構(gòu)接受的，但有產(chǎn)前診斷適應(yīng)征的孕婦；有介入性產(chǎn)前診斷手術(shù)禁忌癥的孕婦（有活動性感染，或者中央性前置胎盤、先兆流產(chǎn)等指征的孕婦）；孕周超出目前產(chǎn)前篩查和產(chǎn)前診斷時限的孕婦隨著技術(shù)的不斷完善，現(xiàn)在雙胞胎也可以做無創(chuàng)產(chǎn)前基因檢測，檢測結(jié)果解讀與絨毛膜性有關(guān)。若為單絨毛膜雙胎，則檢測結(jié)果等同于單胎；若為雙絨毛膜雙胎，則檢測結(jié)果有1/3可能性等同于單胎，2/3可能性為不同雙胎。若雙胎妊娠孕婦的NIPT結(jié)果為高風(fēng)險（陽性），則說明至少有一個胎兒懷疑有非整倍性，就更需要超聲引導(dǎo)的介入性產(chǎn)前診斷技術(shù)定位，分別對兩個胎兒進行羊水穿刺確診。若NIPT結(jié)果為低風(fēng)險，說明99%的把握可排除雙胎或者雙胎之一患有21-三體綜合征、18-三體綜合征、13-三體綜合征，建議孕婦繼續(xù)常規(guī)產(chǎn)科檢查。
綜上所述
無創(chuàng)產(chǎn)前檢測（NIPT）技術(shù)目前已經(jīng)比較成熟，可應(yīng)用于胎兒常見非整倍體的產(chǎn)前篩查，是精確度接近于產(chǎn)前診斷的篩查新技術(shù)。加入了NIPT技術(shù)后的產(chǎn)前篩查與產(chǎn)前診斷服務(wù)流程更顯得完善，在預(yù)防胎兒染色體非整倍體疾病的臨床應(yīng)用中將發(fā)揮更大的作用。此外，隨著NIPT技術(shù)的深入研究和不斷完善，還有可能建立地中海貧血、苯丙酮尿癥等多種單基因遺傳病的無創(chuàng)產(chǎn)前檢測，使二級預(yù)防成為高效降低新生兒出生缺陷率的最佳干預(yù)關(guān)口，減輕社會經(jīng)濟負擔(dān)，提高出生人口的健康素質(zhì)。
參考文獻（略）
