郭海濱,雷家軍
(沈陽農業大學園藝學院,遼寧沈陽110161)
摘要:對葉子花(Bougainvillea glabraChoisy)莖尖組織培養技術進行了研究,篩選出適宜的增殖培養基為MS+6-BA0.5mg·L-1+NAA0.2mg·L-1,增殖系數達到4.0;最適合的生根培養基為MS+IBA1.0mg·L-1,每株平均生根7.2條,根長4.2cm,側根數4.5條。以河沙為基質進行試管苗移栽有利于葉子花的成活,25d后成活率可達78.6%。
關鍵詞:葉子花;莖尖;組織培養；
中圖分類號:S50353文獻標識碼:B
（英文略）
葉子花(B.glabra Chosiy)又名九重葛、寶巾、三角梅,為木質常綠大藤本,是重要的觀賞花卉,我國各地都有栽培,喜熱怕冷,在北方主要以室內盆栽為主。葉子花扦插不易成活,利用組織培養法不僅可以解決其生根難的問題,而且還能快速繁殖優質種苗。
1、材料與方法
1.1試驗材料
材料來源于沈陽農業大學花卉基地,為紅色大花品種,在生長良好健壯、無病蟲害的優良母株上剪取莖尖作為外植體。
1.2試驗方法
1.2.1外殖體消毒先用自來水沖洗,沖刷干凈后,用75%的酒精浸泡2～3s,后用無菌水沖洗,再用0.1%的HgCl2溶液浸泡6min,最后用無菌水沖洗5～6次。
1.2.2培養基及培養條件
誘導培養基MS+6-BA2.0mg·L-1+NAA0.5mg·L-1;增殖培養基MS+6-BA(0～0.5)mg·L-1+NAA(0～0.5)mg·L-1共6個組合;生根培養基MS+IBA(0～2.0)mg·L-1共4個組合,在生根培養基中培養30d后調查生根情況。培養溫度為23～27℃,光照強度3000lx,光照時數12h;光質為熒光燈;環境相對濕度為70%～80%。
1.2.3煉苗移栽取苗高約3～5cm、5～6片葉的試管苗(有根或無根),先在室內煉苗5～6d,洗凈培養基,移栽到基質中。移栽基質為河沙,草炭:園土=3:1,蓋塑料小拱棚保溫,濕度控制在85%～90%,每天噴水1～2次,中午適當遮蔭。10d、15d、20d、25d分別調查成活率。
2、結果與分析
2.1不同激素濃度組合對葉子花誘導與增殖的影響
不同培養基誘導愈傷組織的時間、顏色有差異,增殖系數也不同(見表1)。當6-BA濃度<0.5 mg·L-1,苗生長較慢,形成的側芽數量少,但植株形態正常;當6-BA濃度達到0.5 mg·L-1、NAA濃度達到0.2mg·L-1植株長勢良好,產生的側芽較多,增殖系數可達4.0,愈傷組織形成時間最短,為5d,并且愈傷組織量較少,葉片的形狀正常,新生的幼葉顏色偏紅,但過幾天后轉綠,進入正常生長,生長速度快,個別生根;當6-BA為0.5 mg·L-1、NAA的濃度達到0.5mg·L-1時組培苗出現玻璃化,側芽少,愈傷組織多,有的甚至生長到培養基的表面上,苗比較細弱。可見愈傷組織的多少在一定程度上影響著苗的長勢。葉子花在增殖培養過程中,產生的愈傷組織較疏松,顏色較淺。MS+6-BA0.5+NAA0.2為葉子花增殖最適合的培養基。
表1不同濃度激素處理對葉子花外植體愈傷組織誘導與增殖的影響
下載 (35.02 KB)
2008-11-6 00:04
2.2不同IBA濃度對葉子花生根的影響
葉子花個別植株在增殖培養基中就有生根發生,出現的根有兩種情況,即皮部生根和愈傷組織生根。皮部生根有利于試管苗移栽成活,另外,試管苗生根的好壞主要體現在根系的質量(粗度、長度)和根系的數量兩個方面。不僅要求不定根比較粗壯,更重要的是要有較多的毛細根,以擴大根系的吸收面積,增強根系的吸收能力,提高移栽成活率。MS+IBA1.0為最適合葉子花的生根培養基。
表2不同IBA濃度對葉子花生根的影響
下載 (21.97 KB)
2008-11-6 00:04
2.3不同基質對葉子花移栽成活的影響
由圖1可知,河沙作為移栽基質較合適,25d后移栽成活率達78.6%,明顯高于草炭+田園土。由于草炭+田園土的保水能力太強,幼苗長時間處于高濕缺氧的條件下,組培苗從基部向上腐爛,導致苗大量死亡。在河沙中,組培苗移栽成活率較高,這可能是由于河沙具有一定的保水能力,且透氣性較好。但在15d左右時葉片發黃,變褐脫落,并且無根苗開始死亡。而后,情況逐漸好轉,25d左右根系生長良好。移栽半年后,組培苗就可開花。
圖1不同基質對葉子花扦插成活率的影響
下載 (22.86 KB)
2008-11-6 00:04
3、討論
在增殖過程中,不同培養基中均有愈傷組織的出現,顏色多為黃綠色和綠色,并且很疏松,愈傷組織越多,越不利于葉子花組培苗的生長。這樣的愈傷組織能否進一步誘導分化出苗還有待于進一步研究。
葉子花試管苗容易出現玻璃化,主要表現為葉片呈水浸狀,葉色變深,部分葉片變紅,畸形,嚴重時下部葉片變黑脫落。適當增加瓊脂含量,減少培養基中的游離水,從而降低培養瓶內的濕度,能使玻璃化苗的比率降低;適當降低細胞分裂素的用量;加大光照強度;適當縮短每次的繼代時間;降低培養瓶植株的密度,均可有效的控制玻璃化。
參考文獻
[1]李師翁.葉子花的組織培養與快速繁殖[J].植物生理學通訊,2000,36(3):230
[2]范小峰.葉子花扦插繁殖技術研究[J].甘肅農業大學學報,2003,(12):442～445
[3]Sharama,A.K.,et al.Clo ne Prop agatio nofBo ugainvillea Glabra‘Magnifica’Tro ugh Shoot ApexCult ure.Plant CellTis sue Or gan Cult ure,1981,(1):33～38
下載 (18.45 KB)
2008-11-6 00:04
