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白癜風是以Th1型細胞為主介導的疾病，趨化因子受體3及其配體CXCL9和CXCL10被認為是在白癜風等自身免疫和炎癥過程中促進T細胞遷移最相關的趨化因子軸之一。CXCL9、CXCL10等在白癜風發生發展中起關鍵作用。血清CXCL10可能是監測疾病活動和指導進展期白癜風治療的新型生物標志物。他克莫司是一種免疫調節劑，臨床上已證明其治療白癜風有效。Tu等研究表明，他克莫司對HaCaT細胞IFN-γ相關細胞因子產生影響。本研究采用實時熒光定量PCR及Western印跡法檢測他克莫司對IFN-γ刺激HaCaT細胞分泌CXCL9、CXCL10及相關信號途徑關鍵蛋白的影響，為他克莫司治療白癜風作用機制的研究提供依據，亦可有助于探討其他器官特異性自身免疫疾病的發病機制。
他克莫司對γ干擾素刺激HaCaT細胞分泌趨化因子CXCL9和CXCL10的影響及機制研究
楊賽琳 許文 林福全 周妙妮 許愛娥
作者單位：浙江中醫藥大學附屬杭州第三醫院皮膚科
DOI：10.3760/cma.j.issn.0412-4030.2018.05.013
《中華皮膚科雜志》，2018，51（5）：375-378
【關鍵詞】 白癜風； 干擾素γ； 趨化因子CXCL9； 趨化因子CXCL10； Janus激酶類； STAT1轉錄因子； HaCaT細胞； 他克莫司
1、10、20、40、60、80、100、120 mg/L他克莫司預處理HaCaT細胞4 h后，噻唑藍法（MTT）檢測細胞增殖。HaCaT細胞分為空白對照組，IFN-γ組（500 U/ml），他克莫司組（20 mg/L）及他克莫司+ IFN-γ組。他克莫司預處理HaCaT細胞4 h， IFN-γ刺激細胞12 h或48 h，實時熒光定量PCR檢測細胞CXCL9、CXCL10 mRNA表達。Western印跡法檢測細胞CXCL9、CXCL10、p-JAK1、p-STAT1蛋白表達。ELISA法檢測細胞培養上清液CXCL9、CXCL10蛋白含量。
20 mg/L他克莫司對HaCaT細胞CXCL9、CXCL10、p?JAK1、p?STAT1蛋白表達的影響 1：空白對照組； 2：500 U/ml γ干擾素組； 3：他克莫司組； 4：他克莫司 + γ干擾素組
結果顯示，他克莫司對HaCaT細胞增殖無影響的最大濃度為20 mg/L。20 μg/ml他克莫司能抑制HaCaT細胞中IFN-γ誘導的CXCL9、CXCL10 mRNA與蛋白的表達，能抑制HaCaT細胞培養上清液中CXCL9、CXCL10蛋白表達，抑制HaCaT細胞中JAK1及STAT1的磷酸化。該研究為進一步闡明他克莫司治療白癜風的作用機制及對他克莫司的臨床合理應用提供了一定實驗依據。
