一種治療盆腔炎的藥物組合物及其用途 【專利摘要】本發明提供了一種治療盆腔炎的藥物組合物，它是由如下重量配比的原料藥制備而成的制劑：金剛藤總黃酮提取物10-20份、金剛藤多糖提取物1-5份；所述金剛藤多糖提取物中多糖含量大于20%w/w。本發明還提供了該提取物的制備方法和用途。本發明還提供了基于該提取物的治療盆腔炎的組合物等。本發明研究發現，將金剛藤多糖與金剛藤總黃酮提取物配伍使用后，其抗炎、增強免疫、活血化瘀等藥效活性更強，對盆腔炎有更為良好的治療作用，為臨床用藥提供了新的選擇。 【專利說明】一種治療盆腔炎的藥物組合物及其用途 【技術領域】 [0001]本發明涉及一種治療盆腔炎的藥物組合物及其用途。 【背景技術】 [0002]隨著人們生活節奏的加快，經濟水平的提高，人們對生活質量的要求也越來越高。某些慢性疾病不會直接導致生命危險，但由于病情長時間的纏綿不愈、反復發作，也會給人們的生活帶來不便和不適，慢性盆腔炎就是這類疾病之一，慢性盆腔炎(chronic pelvicinflammatory disease,CPID)是指女性生殖器官、周圍結締組織及盆腔腹膜所發生的慢性炎癥，是育齡期婦女最常見的生殖器宮炎癥之一，具有病程長、病情復雜、復發率高等特點。慢性盆腔炎會導致不孕、宮外孕、異位妊娠、其它婦科炎癥，并影響家庭生活。 [0003]金剛藤Smilax scobinicaulis C.H.Wright (《西藏常用中草藥》)，始載于《名醫別錄》，云:“菝葜，生山野，二月，八月采根，暴干”，“主腰背寒痛，風痹，益血氣，止小便利。“《本草綱目》:〃治消渴，血崩，下利”。 [0004]目前研究者均認為，金剛藤治療婦科炎癥有效成分主要集中在皂苷類和黃酮類兩大部位，治療的病癥主要為婦科炎癥、附件炎、炎性包塊。而現代金剛藤藥材的研究也局限于對黃酮和皂苷的純化工藝(如專利申請號:200810030463.7，其實施例2制備了一種總黃酮含量為56%的菝葜提取物)，以及將已有的兩種有效成分加工為不同的制劑，在金剛藤相關專利中不難發現各種制劑的物質基礎僅有皂苷類和黃酮類兩類(如專利申請:200610020853.7)，制劑卻千變萬化，現已有膠囊劑、軟膠囊劑、片劑、緩釋片、咀嚼片等。 [0005]目前還未見對金剛藤多糖類成分的相關報道，更未見將金剛藤多糖類成分與總黃酮提取物進行復配的報道。 【發明內容】 [0006]本發明的目的在于提供一種治療盆腔炎的組合物及其用途。 [0007]本發明提供了一種治療盆腔炎的藥物組合物，它是由如下重量配比的原料藥制備而成的制劑: [0008]金剛藤總黃酮提取物10-20份、金剛藤多糖提取物1-5份；所述金剛藤多糖提取物中多糖含量大于20%w/w。 [0009]進一步地，它是由如下重量配比的原料藥制備而成的制劑: [0010]金剛藤總黃酮提取物15份、上述的金剛藤多糖提取物3份。 [0011]其中，所述金剛藤多糖提取物中，多糖含量為40~95%w/w，優選為40~60%w/w，更優選為40~50%w/w。 [0012]其中，所述金剛藤多糖提取物的制備方法包括如下操作步驟: [0013]( I)取金剛藤，采用有機溶劑提取即可，所述有機溶劑選自甲醇、乙醇、石油醚、乙醚、丙酮、正己烷、氯仿中的一種或兩種以上的混合溶劑； [0014](2)脫脂后的金剛藤經水提醇沉，沉淀干燥，即得金剛藤多糖提取物。[0015]進一步地，步驟(1)中，所述有機溶劑為乙醇，乙醇濃度為70-95%v/v，優選為75~80%v/V 乙醇。 [0016]進一步地，步驟(2)具體操作如下:取藥渣，揮干溶劑，加水提取，合并提取液，離心,取上清液,濃縮后,加入乙醇至含醇量為70~80%v/v，低溫靜置，離心，收集沉淀，干燥，即得金剛藤多糖提取物。 [0017]更進一步地,步驟(2)中，上清液濃縮至0.3~0.5g生藥/ml ；95%乙醇加入體積為濃縮液體積的4倍以上。 [0018]優選地，步驟(1)的具體操作為:稱取金剛藤藥材100g，加入8倍量的75%v/v乙醇回流提取3次，提取時間分別為2h、2h、lh，濾過，將藥渣揮干溶劑，再加入12倍量的水，80°C提取2次，每次提取2，合并水提液，離心，將上清液減壓濃縮至藥液濃度為0.4g生藥/ml ； [0019]步驟(2)的具體操作為:濃縮液中加入4倍量95%v/v乙醇，充分混合，4°C靜置過夜，4000r/min離心10min,收集沉淀,50°C減壓干燥，即得金剛藤多糖提取物。 [0020]其中，本發明所述金剛藤總黃酮提取物可以采用目前已知的黃酮含量在50%w/w以上的金剛藤提取物，如專利申請號:200810030463.7的實施例2，就提供了一種總黃酮含量為56%的菝葜提取物。 [0021]本發明所述金剛藤總黃酮提取物中黃酮含量在50%w/w以上；優選地，所述金剛藤總黃酮提取物中，黃酮含量為50%~60%w/w。 [0022]進一步地，所述金剛藤總黃酮提取物是由如下方法制備得到的: [0023]A、稱取金剛藤藥材，加入70~80%v/v乙醇提取，合并提取液，過濾，濾液減壓回收乙醇后，濃縮液備用； [0024]B、濃縮液上中極性大孔吸附樹脂，依次用蒸餾水、65~75%v/v乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，回收溶劑，干燥即得金剛藤總黃酮。 [0025]優選地，步驟A中，乙醇濃度為75%v/v ;步驟B中，大孔吸附樹脂為DlOl，洗脫用乙醇濃度為70%v/v。 [0026]本發明還提供了上述藥物組合物在制備治療盆腔炎或抗炎、增強免疫、活血化瘀的藥物中的用途。 [0027]本發明研究發現，將金剛藤多糖與金剛藤總黃酮提取物配伍使用后，其抗炎、增強免疫、活血化瘀等藥效活性更強，對盆腔炎有更為良好的治療作用，為臨床用藥提供了新的選擇。 [0028]另外，本發明組合物所用多糖提取物和總黃酮提取物出膏率較低，明顯降低了金剛藤類藥物的每日服藥量，更便于患者使用。 【專利附圖】 【附圖說明】 [0029]圖1提取時間對出膏率及提取液中多糖濃度的影響 [0030]圖2提取次數對出膏率及多糖濃度的影響 [0031]圖3固液比對出膏率及提取液中多糖總量的影響 [0032]圖4提取溫度對出膏率及多糖含量的影響 [0033]圖5正常大鼠子宮病理形態(HE染色，200 X) [0034]圖6正常大鼠子宮病理形態(HE染色，100 X)[0035]圖7模型組大鼠子宮病理形態(HE染色，200 X) [0036]圖8模型組大鼠子宮病理形態(HE染色，100 X) [0037]圖9陽性組大鼠子宮病理形態(HE染色，200 X) [0038]圖10陽性組大鼠子宮病理形態(HE染色，100X) [0039]圖11多糖組大鼠子宮病理形態(HE染色，200 X) [0040]圖12多糖組大鼠子宮病理形態(HE染色，100 X) [0041]圖13黃酮組大鼠子宮病理形態(HE染色，200 X) [0042]圖14黃酮組大鼠子宮病理形態(HE染色，100 X) [0043]圖15混合物組大鼠子宮病理形態(HE染色，200 X) [0044]圖16混合物組大鼠子宮病理形態(HE染色，100 X) 【具體實施方式】 [0045]實施例1金剛藤多糖提取物的制備 [0046]稱取金剛藤藥材100g，置于2000ml圓底燒瓶中，加入8倍量的75%乙醇溶液，浸泡過夜，水浴加熱回流提取2h，濾過，再加入8倍量75%乙醇回流提取2h，濾過，再加入8倍量的75%乙醇回流提取lh，濾過，將殘渣揮干溶劑，再加入12倍量的水，80°C水浴加熱回流提取2h，濾過，再加入12倍量的水，加熱回流提取2h，再重復一次，濾過，合并提取液，離心，將上清液減壓濃縮至250ml (即藥液濃度為0.4g生藥材/ml)。 [0047]將濃縮液中加入4倍量的95%乙醇，充分混合，4°C靜置過夜，離心(4000r/min，lOmin)，收集沉淀，50°C減壓干燥，研磨成粉末，即得金剛藤多糖提取物。經測定，該提取物中，多糖含量為41%。 [0048]實施例2金剛藤多糖提取物的制備 [0049]稱取金剛藤藥材，粉碎得40-80目金剛藤粗粉，用去離子水浸泡，金剛藤粗粉與去離子水的質量比為1:10-30，加堿調節P H值至7-10，再于微波條件下提取3-10min，微波功率300-800 W，過濾收集濾液，濾餅重復提取，共提取2-5次，合并每次的濾液收集為提取液；所得的提取液，加酸調節P H值至2-5，再加入1:2-4乙酸乙酯萃取，攪拌后靜置、分層，保留收集下層，重復用乙酸乙酯萃取2-5次，合并所有的下層，收集為保留液；保留液用三氯乙酸溶液調節P H值至2-3，降低溫度至4-10°C，攪拌、靜置8-12 h后，離心，除去沉淀物，收集上清液；上清液超濾，至濃縮液中多糖質量濃度為5% -15%，超濾膜截留分子量為5000-10000 D，濃縮液中加入體積濃度為95% -100%乙醇水溶液至乙醇體積分數為70% -80%，降溫至4-10°C，攪拌、靜置12-18 h后，離心，收集沉淀物；沉淀物，經減壓低溫干燥、粉碎，即得金剛藤多糖提取物。經測定，該提取物中，多糖含量為95%。 [0050]實施例3金剛藤總黃酮提取物的制備 [0051] 稱取100g金剛藤藥材，加入8倍量75%乙醇浸泡過夜，水浴加熱回流提取3次，時間為2h、2h、Ih,合并提取液,過濾,減壓回收乙醇,至無醇味,用純凈水定容至250ml (即0.4g生藥材/ml);上DlOl大孔吸附樹脂，柱體積為250cm3，徑高比為1:3，先用2BV的蒸餾水洗脫，再用3BV的70%乙醇溶液洗脫，收集70%乙醇洗脫液，50°C減壓回收乙醇，至一定體積后，轉入蒸發皿中，在水浴鍋上將溶液揮發至近干，轉入50°C減壓干燥箱中干燥，干燥后，即得金剛藤總黃酮提取物。經測定，該提取物中黃酮含量為58.7%。[0052]上述總黃酮提取物方法也可參見專利申請號:200810030463.7。 [0053]實施例3金剛藤多糖部位提取的方法學考察 [0054]1.1儀器和試劑 [0055]紫外-可見分光光度計，型號:UV-1700，SHIMADZU C0P0RAT10N公司生產。 [0056]葡萄糖標準品(lOOmg，≥99%)，生產批號:P-012_110821，成都瑞芬思生物科技有 限公司生產。 [0057]苯酚(分析純):成都市科龍化工試劑廠。 [0058]濃硫酸(98.8%，分析純):成都市科龍化工試劑廠生產。 [0059]1.2方法與結果 [0060]1.2.1供試品溶液的配置 [0061]精密稱取金剛藤藥材30g，加入10倍80%乙醇水浴加熱回流1.5h，濾過，濾渣揮干，加入10倍水加熱回流1.5h，濾過將提取液減壓回收溶劑至60ml，加入4倍量95%乙醇4°C沉淀過夜，離心，收集沉淀，50°C減壓干燥，研磨成粉，精密稱取該多糖粗粉30.22mg，用水溶解，定容至50ml，混勻，作為供試品溶液備用。1.2.2對照品溶液的配置 [0062]精密稱取葡萄糖對照品溶液10.34mg，置100mL容量瓶中，加水定容至刻度，混勻，配置成0.1034mg/ml葡萄糖對照品溶液配用。 [0063]1.2.3顯色方法 [0064]取一定體積待測樣品溶液，加水至2ml，加入lml5%苯酚溶液，混勻，再迅速加入5ml濃硫酸,混勻,靜置IOmin,在40°C水浴加熱15min,冰水浴冷卻5min,取出，在490nm處 測定吸光度。 [0065]1.2.4標準曲線的繪制 [0066]分別精密吸取葡萄糖對照品溶液0.50ml、060ml、0.70ml、0.80ml、0.90ml、1.0Oml置于IOml具塞試管中，用水定容至2ml，按2.2.3顯色方法顯色，測定吸光度，以對照品溶液濃度(C)為橫坐標，吸光度(A)為縱坐標，繪制標準曲線。(?= 10.34/100=0.1034mg/ml [0067]表1葡萄糖對照品標準曲線 [0068] 【權利要求】 1.一種治療盆腔炎的藥物組合物，其特征在于:它是由如下重量配比的原料藥制備而成的制劑: 金剛藤總黃酮提取物10-20份、金剛藤多糖提取物1-5份；所述金剛藤多糖提取物中多糖含量大于20%w/w。 2.根據權利要求1所述的藥 物組合物，其特征在于:它是由如下重量配比的原料藥制備而成的制劑: 金剛藤總黃酮提取物15份、上述的金剛藤多糖提取物3份。 3.根據權利要求1或2所述的藥物組合物，其特征在于:所述金剛藤多糖提取物中，多糖含量為40~95%w/w，優選為40~60%w/w。 4.根據權利要求3所述的藥物組合物，其特征在于:所述金剛藤多糖提取物的制備方法包括如下操作步驟: (1)取金剛藤，采用有機溶劑提取即可，所述有機溶劑選自甲醇、乙醇、石油醚、乙醚、丙酮、正己烷、氯仿中的一種或兩種以上的混合溶劑； (2)脫脂后的金剛藤經水提醇沉，沉淀干燥，即得金剛藤多糖提取物。 5.根據權利要求4所述的藥物組合物，其特征在于:步驟(1)中，所述有機溶劑為乙醇，乙醇濃度為70-95%v/v，優選為75~80%v/v乙醇。 6.根據權利要求4所述的藥物組合物，其特征在于:步驟(2)具體操作如下:取藥渣，揮干溶劑，加水提取，合并提取液，離心，取上清液，濃縮后，加入乙醇至含醇量為70~80%v/v，低溫靜置，離心，收集沉淀，干燥，即得金剛藤多糖提取物。 7.根據權利要求6所述的藥物組合物，其特征在于:步驟(2)中，上清液濃縮至0.3~0.5g生藥/ml ；95%乙醇加入體積為濃縮液體積的4倍以上。 8.根據權利要求4所述的藥物組合物，其特征在于:步驟(1)的具體操作為:稱取金剛藤藥材100gJPA 8倍量的75%v/v乙醇回流提取3次，提取時間分別為2h、2h、lh，濾過，將藥渣揮干溶劑，再加入12倍量的水，80°C提取2次，每次提取2，合并水提液，離心，將上清液減壓濃縮至藥液濃度為0.4g生藥/ml ； 步驟(2)的具體操作為:濃縮液中加入4倍量95%v/v乙醇，充分混合，4°C靜置過夜，4000r/min離心10min,收集沉淀,50°C減壓干燥，即得金剛藤多糖提取物。 9.根據權利要求1或2所述的藥物組合物，其特征在于:所述金剛藤總黃酮提取物中，黃酮含量在50%w/w以上；優選地，所述金剛藤總黃酮提取物中，黃酮含量為50%~60%w/w。 10.根據權利要求9所述的藥物組合物，其特征在于:所述金剛藤總黃酮提取物是由如下方法制備得到的: A、稱取金剛藤藥材，加入70~80%v/v乙醇提取，合并提取液，過濾，濾液減壓回收乙醇后，濃縮液備用； B、濃縮液上中極性大孔吸附樹脂，依次用蒸餾水、65~75%v/v乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，回收溶劑，干燥即得金剛藤總黃酮。 11.根據權利要求11所述的藥物組合物，其特征在于:步驟A中，乙醇濃度為75%v/v；步驟B中，大孔吸附樹脂為DlOl，洗脫用乙醇濃度為70%v/v。 12.權利要求1~11任意一項所述藥物組合物在制備治療盆腔炎或抗炎、增強免疫、活血化瘀的藥物中的用途。 【文檔編號】A61K31/715GK103893473SQ201310737797 【公開日】2014年7月2日 申請日期:2013年12月27日 優先權日:2012年12月27日 【發明者】譚周菊 申請人:成都立力醫藥科技有限公司。
