2',3'-環(huán)鳥苷單磷酸-腺苷單磷酸(2',3'-cGAMP)是一種哺乳動物信使分子。2',3'-cGAMP是在后生動物中發(fā)現的第一個環(huán)狀二核苷酸。2',3'-cGAMP是一種“非規(guī)范”cGAMP,因為鳥苷和腺苷之間有非典型的2'-5'磷酸二酯連接。2',3'-環(huán) GAMP 是先天免疫中的一種新型第二信使,可調節(jié) I 型干擾素 (IFN) 的產生。cGAMP在哺乳動物細胞中由cGAS(cGAMP合酶)響應細胞質中與cGAS結合的雙鏈DNA產生,cGAMP與干擾素基因(STING)的刺激物結合。隨后,STING誘導TBK1-IRF3依賴性IFN-β的產生。這種cGAS-cGAMP-STING途徑在病原體檢測和生理狀況(如代謝失調,自身免疫和癌癥)中至關重要。
Arbor Assays 2′,3′-環(huán) GAMP ELISA 試劑盒#K067-H規(guī)格:
檢測類型:有競爭力的酶聯免疫球蛋白
樣品類型:細胞裂解物、組織提取物、組織培養(yǎng)基
敏感性:0.048 皮摩爾/毫升
物種:2',3'-環(huán)狀 GAMP 在物種間是相同的
檢測持續(xù)時間:2.5 小時
樣品/板:183 一式兩份
讀數:比色法,450 nm
Arbor Assays2′,3′-環(huán) GAMP ELISA 試劑盒標準曲線:
Arbor Assays 2′,3′-環(huán) GAMP ELISA 試劑盒檢測原理:
2',3'-環(huán)狀 GAMP ELISA 試劑盒(384 孔板)定量測量裂解細胞和組織、EDTA 血漿和組織培養(yǎng)基樣品中存在的 2',3'-cGAMP。2',3'-環(huán) GAMP ELISA 試劑盒(384 孔板)符合 NIST 標準。在進行此測定之前,請閱讀完整的試劑盒說明書。
使用我們提供的2',3'-環(huán)GAMP(cGAMP)標準品生成測定的標準曲線。將標準品或稀釋的樣品移液到涂有我們的山羊抗兔IgG抗體的透明微量滴定板中。加入 2',3'-cGAMP-過氧化物酶偶聯物和 2',3'-cGAMP 多克隆兔抗體。免疫反應發(fā)生在抗-2',3'-cGAMP多克隆抗體、樣品或標準品中的2',3'-cGAMP抗原和2',3'-cGAMP-過氧化物酶偶聯物之間。隨著樣品中皮質醇濃度的增加,結合的皮質醇-過氧化物酶偶聯物減少,導致信號降低,反之亦然。我們建議在室溫下振蕩孵育2小時。
孵育2小時后,洗去多余的2',3'-cGAMP-過氧化物酶并加入TMB底物。TMB底物與結合的皮質醇-過氧化物酶偶聯物反應,產生由讀板器在450nm處檢測到的信號。使用強度和標準曲線計算樣品中的皮質醇濃度。