內(nèi)質(zhì)網(wǎng)（ER）應(yīng)激促進(jìn)腫瘤細(xì)胞逃避免疫監(jiān)測。然而，基本機(jī)制仍然未知。本文作者發(fā)現(xiàn)，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激誘導(dǎo)肝細(xì)胞癌（HCC）細(xì)胞釋放外體，通過調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞的程序性死亡配體1（PD-L1）的表達(dá)來減弱抗腫瘤免疫。
作者首先展示了ER stress相關(guān)marker的蛋白和mRNA水平肝癌組織中的表達(dá)明顯高于癌旁，說明肝癌患者普遍存在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激。
并且ER-stress的激活預(yù)示著較差的總生存。
隨后作者發(fā)現(xiàn)，表達(dá)高水平ERmarker GRP78的腫瘤組織在基質(zhì)中有大量的CD68染色，說明CD68+巨噬細(xì)胞浸潤較多，而表達(dá)低水平GRP78的腫瘤組織中CD68+巨噬細(xì)胞浸潤要低得多（A）。B：PD-L1表達(dá)與GRP78水平呈正相關(guān)。C-D：qPCR和Western Blot分析表明，與配對的癌旁組織相比，腫瘤組織中PD-L1的mRNA和蛋白質(zhì)明顯上調(diào)。
E:作者已經(jīng)證明了ER stress與巨噬細(xì)胞浸潤和PD-L1的表達(dá)相關(guān)。隨后作者進(jìn)行了免疫熒光，發(fā)現(xiàn)在GRP78高的肝癌基質(zhì)中，PD-L1與CD68+巨噬細(xì)胞存在共定位。F：高的PD-L1表達(dá)預(yù)示著差的生存。
接著，作者用PKH67標(biāo)記的外泌體與巨噬細(xì)胞共培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)巨噬細(xì)胞可以有效地?cái)z取外泌體（A）。
B-E通過流式細(xì)胞術(shù),WB,免疫組化和qPCR分析顯示，與ER stress的HepG2外泌體共培養(yǎng)后，巨噬細(xì)胞中的PD-L1表達(dá)明顯上調(diào)。
體內(nèi)實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步證明TM誘導(dǎo)ER stress的肝癌細(xì)胞外泌體增加巨噬細(xì)胞PD-L1的表達(dá)。
作者進(jìn)一步研究了ER-stress的肝癌細(xì)胞外泌體處理的巨噬細(xì)胞對T細(xì)胞的影響。
A-C：與對照組相比， ER-stress的肝癌細(xì)胞外泌體處理的巨噬細(xì)胞顯著降低CD8+T細(xì)胞比例，并降低T細(xì)胞中的IL-2生成。
D：ER-stress的肝癌細(xì)胞外泌體處理的巨噬細(xì)胞促進(jìn)T細(xì)胞凋亡。
為了找到發(fā)揮作用的關(guān)鍵分子，作者做了ER-stress的肝癌細(xì)胞外泌體的高通量測序，并以miR-23a-3p為研究對象。
B-C:作者通過生信分析預(yù)測miR-23a-3p靶向PTEN，并證明miR-23a-3p可調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞PTEN/AKT通路，和PD-L1的表達(dá)。（直接用mimic和inhibitor做統(tǒng)計(jì)比較差異著實(shí)讓人搞不懂）
最后，作者進(jìn)一步證明外泌體miR-23a-3p通過PTEN/AKT通路調(diào)控D-L1的表達(dá)。
本文的研究聚焦與最近火熱的免疫和外泌體研究。文章主要思路：
1 ER stress與肝癌密切相關(guān)。
2 ER stress的肝癌外泌體促進(jìn)巨噬細(xì)胞PD-L1表達(dá)。
3 受影響的巨噬細(xì)胞促進(jìn)T細(xì)胞凋亡。
4 ER stress的肝癌外泌體內(nèi)miR-23a-3p通過PTEN/AKT通路調(diào)控巨噬細(xì)胞D-L1的表達(dá)。
總的來說文章不算太嚴(yán)謹(jǐn)，而且沒有返回到巨噬細(xì)胞或T細(xì)胞對肝癌細(xì)胞的影響，機(jī)制也沒有很深，可能是沒有發(fā)到更高分文章的原因吧。同樣大家可以用類似的思路做課題，比如乏氧/ROS應(yīng)激/其他處理的某腫瘤細(xì)胞促進(jìn)某基因在外泌體中高表達(dá)，從而對巨噬細(xì)胞/DC細(xì)胞/T細(xì)胞等免疫/基質(zhì)細(xì)胞產(chǎn)生影響，這些細(xì)胞又通過某機(jī)制對癌細(xì)胞有什么反饋的功能……
好了，今天的文獻(xiàn)就分享到這里吧，下次見。
