年齡相關性黃斑變性（AMD）是由多因素誘發的、與年齡密切相關的視網膜黃斑區改變疾病，是發達國家60歲以上人群失明的主要原因。早期AMD可能與布魯赫膜（BM）和視網膜色素上皮層（RPE）之間的病理沉積物（玻璃膜疣）有關，晚期AMD具有干性、濕性兩種形式。濕性AMD只占總發病人群10%～15%［1］，而脈絡膜新生血管（CNV）的產生直接導致了患者視力急性下降乃至喪失［2］。干性AMD主要表現為RPE細胞、光感受器和脈絡膜毛細血管退化，也稱地圖狀萎縮（GA）。
玻璃體內注射抗血管內皮生長因子（VEGF）藥物已被推薦為濕性AMD的臨床一線治療方法［3］，但部分患者經過了標準化的抗VEGF治療，仍會出現持續性液體滲出。患有難治性或復發性濕性AMD的患者可能會產生對抗VEGF治療的耐藥機制，這導致抗 VEGF藥物治療效果下降［4］。相比之下，GA的致病機制仍不清楚，目前暫無獲批上市的治療藥物［5］。由于沒有可用于修復受損RPE細胞或感光細胞的治療方法，因此，治療方法可能會集中在視網膜色素變性（RP）細胞丟失之前的早期干預，以及疾病后期階段，用干細胞衍生的RPE或感光細胞替代已丟失視網膜細胞［6］，包括人類視網膜移植、人工視覺、視網膜假體、神經保護［7］等。
隨著基因治療的進步及腺相關病毒（AAV）載體的開發給眼科疾病的治療帶來了希望。由于眼部的“免疫豁免”特點，重組腺相關病毒（rAAV）裝載片段基因可以經玻璃體腔注射感染視網膜細胞，在不引起全身免疫反應的情況下，單次注射可持續表達至少2.5年［8］，極大改善了患者的生活質量，同時降低眼部創傷給藥的頻率與手術風險。治療眼部疾病的基因療法仍處于起步階段，大多數藥物臨床試驗仍處于研究階段。
AAV是目前研究最活躍的基因治療載體之一，其具有穩定和長期表達等特點。其中，AAV血清型1、2、4和5的載體已經實現了高水平的視網膜基因轉移。而治療AMD的產品中更多的使用AAV2、AAV8，這可能與視網膜內轉導效率與啟動速度相關［9］。下文羅列了使用AAV或rAAV載體的部分AMD基因治療藥物，并根據目前的AMD機制研究，按照不同機制或靶點進行劃分，詳細闡述已取得藥理學研究進展。
ADVM-022是編碼阿柏西普的rAAV2.7m8，針對玻璃體內注射攜帶抗VEGF cDNA的載體進行了優化，具有高效的視網膜轉導效率，從而實現阿柏西普的持續表達。在接受ADVM-022治療的激光誘導食蟹猴CNV模型中，7只食蟹猴CNV模型雙眼玻璃體腔注射2×10^12病毒基因組（vg）的ADVM-022，對照組的7只食蟹猴雙眼注射等體積溶劑，阿柏西普作為陽性對照。
接受ADVM-022治療動物的視網膜、脈絡膜內均能檢測到高水平的阿柏西普，且玻璃體內阿柏西普水平在給藥后3～9個月不斷升高并穩定在一定范圍內，給藥7個月后房水中的阿柏西普水平與每月或每兩個月推注阿柏西普蛋白的人類受試者房水中的阿柏西普水平相似［3］，激光后第2周和第4周，空白組滲出性病變的發生率分別為43%和40%，CNV復合面積分別為142 369 μm2和82 923 μm2，與空白組相比，接受ADVM-022治療的動物在治療后第2周和第4周滲出性病變發生率明顯降低（分別為6%、0），CNV復合體面積顯著縮小（分別為44 503、26 622 μm2），與陽性藥物組療效相似。
1項持續2.5年的臨床前實驗評估了非人靈長類動物中單次雙側玻璃體內注射ADVM-022 2×10^12vg后持續表達阿柏西普的長期安全性，實驗結果表明，與空載體組相比，經單次給藥所產生的阿柏西普持續表達可維持至給藥后30個月，治療期間內動物視網膜結構與視網膜功能均無顯著影響，給藥后2.5年未觀察到組織學異常，具有良好的耐受性與安全性［8］。
RGX-314是重組AAV8載體，攜帶1個可溶性抗VEGF蛋白的編碼序列。該載體在轉導的視網膜細胞中表達類似于雷珠單抗的可溶性抗VEGF單克隆抗體片段。
Shen等［10］測試了視網膜下注射RGX-314在rho/VEGF小鼠模型中的功效，劑量3×10^6～1×10^10基因拷貝組（GC）。結果表明，與空載體組相比，小鼠經視網膜下注射≥1×10^7 GC的RGX-314，視網膜下新生血管（SNV）平均面積顯著降低，注射劑量≤3×10^7 GC的SNV平均面積減少了50%，劑量為3×10^9、1×10^10 GC的眼底SNV幾乎完全消除。
Liu等［1］在rho/VEGF小鼠視網膜下腔注射1 μL（劑量1×10^8～1×10^10 GC）AAV8-antiVEGF fab抑制視網膜新生血管的實驗結果得出相同結論，結果顯示視網膜下注射1×10^10 GC空AAV8載體的對照組小鼠與視網膜下注射PBS的空白組小鼠眼內可見相當數量的SNV，rho/VEGF小鼠視網膜下注射1×10^10、3×10^9或1×10^9 GC AAV8-antiVEGF fab，眼底可見非常小的SNV，3×10^8、1×10^8 GC組小鼠可見更多SNV，但仍少于對照組和空白組。
除此之外，在飲用水中加入2 mg·mL-1多西環素后，1×10^8、3×10^8 GC劑量組中的大多數小鼠與對照組和空白組的全部小鼠均觀察到了滲出性視網膜脫離，而3×10^10、1×10^10 GC組中，多數小鼠沒有視網膜脫離。1項持續1年的安全性實驗［11］表明非人靈長類動物單次、單側、視網膜下注射AAV8-antiVEGF Fab在低劑量組（1×10^10 GC）表現出長期安全性，在12個月的隨訪期間，與未注射的眼睛相比，在載體注射的眼睛中沒有觀察到顯著變化，內核層、外核層厚度無顯著變化，而高劑量組（1×10^13 GC）6只注射眼中，4只注射區域內顯示出顯著的視網膜外核層變薄，視網膜增厚等改變，未來需要進一步確定RGX-314臨床試驗劑量上限。
可溶性FMS樣酪氨酸激酶1（sFLT-1）是高度有效的內源性VEGF-A抑制劑，可結合并中和VEGF-A，阻止VEGF與其內皮受體的正常結合，僅sFLT-1就足以在嚙齒動物和靈長類動物模型中提供抗CNV形成的保護作用［12］。臨床前嚙齒動物模型證明了視網膜下給藥rAAV.sFLT-1預防CNV形成的機制［13］。Lai等［14］驗證了注射rAAV.sFLT-1的安全性與耐受性。將8只非人靈長類動物左眼視網膜下注射AAV2.sFIT-1 1.9×10^10轉導單位（TU），1只未注射動物作為對照，結果表明視網膜下注射AAV2.sFIT-1 3個月后左眼、右眼、視神經組內均檢測到sFIT-1表達，并持續表達至注射后12個月。除注射部位的局部刺激外，無任何不良反應產生，也不會引起細胞免疫反應。
補體失調被認為是干性AMD的關鍵危險因素，其中替代途徑的基因與發展該疾病的風險相關。GT005是表達重組人補體因子I（hCFI）的AAV2產品，其作為補體抑制劑已在數個模型被證實有效性，受試動物經視網膜下給藥每眼GT005 2×10^7～2×10^8 GC，陰性對照動物接受2×10^8 GC空載體，陽性對照小鼠在激光治療后玻璃體內接受80 μg阿柏西普，注射后可在小鼠外層視網膜檢測到hCFI mRNA與蛋白質，通過hCFI的高表達減少補體激活導致CNV面積劑量相關地減少［15］，差異在每眼5×10^7、2×10^8 GC劑量下具有統計學顯著性［16］。
在非靈長類動物視網膜下注射低劑量（每眼7×10^10 vg）和高劑量（每眼3.5×10^11 vg）GT005后，從2周至26周在玻璃體液中均可檢測到hCFI蛋白，并在第13周達到最大水平（805±249）ng·mL-1，GT005可顯著改善GA病變，減小GA區域及提高視網膜功能，但自13周后，hCFI水平降低逐漸下降，治療水平下降，可能與hCFI抗體滴度、抗hCFI抗體生成相關［17］。
CD59是天然存在的膜攻擊復合物（MAC）形成的膜結合抑制劑。通過結合C5B678末端補體蛋白復合物和阻止C9分子的摻入而發揮作用［18］。通過AAV載體將膜結合的人源CD59導入小鼠RPE細胞，可以保護RPE細胞免受人補體介導的體外裂解，使激光誘導的CNV減少約60%［19］。
Cashman等［20］的研究中，建立rAAV2-CD59（HMR59）療法，使用非膜結合的可溶性重組CD59（sCD59）作為MAC形成的抑制劑，經玻璃體腔注射AAV2-sCD59（8×10^9 vg），增加sCD59的表達，減少激光光凝誘導的CNV面積61.7%（±19.9%）。Adhi等［21］在誘導糖尿病前2周在小鼠玻璃體內注射AAV2/8-sCD59（9×10^8 vg），然后ip鏈脲佐菌素連續4 d誘導糖尿病性視網膜病變小鼠模型，與未接受注射的對側眼相比，誘導前2周預注射AAV2/8-sCD59的眼睛減少神經節細胞凋亡，增加視網膜Müller細胞活化，減輕視網膜血管滲漏，抑制MAC沉積能力，減少40%的MAC生成。1項由低、中和高劑量組成的劑量遞增研究（NCT03144999）已完成，但尚未公布結果。
色素上皮衍生因子（PEDF）是相對分子質量5×10^4的蛋白質，其晶體結構顯示出獨特的絲氨酸蛋白酶抑制劑及肝素和膠原蛋白結構域，可在增殖的內皮細胞中誘導細胞凋亡，是一種天然的血管生成抑制劑，其功效已在多種細胞和動物實驗中得到證明。1項研究指出，通過眼部注射（玻璃體腔注射1×10^9顆粒、視網膜下注射1×10^8顆粒）含有編碼PEDF基因的腺病毒可抑制rho/VEGF小鼠模型中的視網膜新生血管和CNV形成，治療14 d后，玻璃體內注射1×10^9顆粒小鼠眼底CNV面積較對照組更小，同時小血管開始退化，只留下了大血管，意味著PEDF可能促進構成新血管的細胞中的程序性細胞凋亡，已經形成的新生血管開始消退［22］，存在治愈AMD的可能性。
Yu等［23］將大鼠暴露于激光進行誘導建立CNV模型，通過玻璃體內注射慢病毒-PEDF-綠色蛋白熒光（濃度1×10^7 TU·L-1給藥5 μL），對照組給予等劑量空病毒載體。自給藥7 d起開始發揮治療作用，給藥4周可在光感受器和RPE中觀察到綠色熒光，并且可持續表達28 d，治療組動物眼底CNV區域的大小自給藥后7 d顯著減少，第7、14、21、28天OCT圖片顯示CNV厚度顯著降低。PCR和Western blotting分析表明第7、14、21、28天PEDF表達水平明顯上調，VEGF和Flk-1表達水平下降。但值得注意的是，慢病毒有較高并且較穩定的轉染能力［24］，但同時具有潛在的整合與遺傳毒性風險［25］，未來需要對載體進一步改造并評價其安全性。
Ang-1通過內皮細胞特異性Tie-2受體酪氨酸激酶發出信號。Ang-Tie系統是人血管穩態的重要調節因子，是血管穩態的關鍵參與者，包括血管重塑、成熟和穩定，通過Ang-1激活Tie-2受體可維持血管穩定性以限制滲出［26］。在小鼠濕性AMD模型中，玻璃體腔內注射rAAV-Ang-1與VEGF抑制劑一樣有效地抑制CNV的形成［27］。
Lambert等［27］在小鼠視網膜下注射AAV2.COMP-Ang-1（3×10^11 vg·mL-1、1 μL），并在視網膜下注射后1個月接受激光光凝建立CNV模型，Western blotting結果顯示視網膜下注射2個月時，COMP-Ang1蛋白在RPE/脈絡膜中成功表達，并且AAV2.COMP-Ang1組中的VEGF濃度（0.10±0.01）pg·μg-1明顯低于對照組（0.14±0.03）pg·μg-1，共聚焦圖像分析發現AAV2.COMP-Ang1組的CNV的面積為（6.36±1.94）×104 μm3，顯著小于對照組的（16.12±3.16）×104 μm3，面積下降了30%～39%。
光遺傳學方法是指通過AAV載體引入視紫紅質亞家族光敏蛋白的DNA序列，使細胞對光有反應。通道視紫紅質蛋白在綠藻中充當感覺神經感受器。研究發現，一旦該蛋白在人眼內表達，就能賦予神經節細胞（RGC）類似光感受器的功能，從而讓患者恢復視力［28-29］。
RGC中表達光敏視蛋白是恢復視力的有吸引力的方法，Douar等［29-30］通過在獼猴眼內單次雙側玻璃體腔內每眼給予GS030 5×10^ 11 vg，發現4只動物在治療2月后，視力明顯改善，4個治療眼中有3個顯示出對光刺激的高振幅電反應，無全身或局部不良反應產生，眼科檢查未見異常，治療6月后動物房水內仍有AAV表達。一旦成功，未來也許可以用于AMD中央視網膜萎縮區的視覺恢復。Christian等［31］在小鼠眼內進行了安全性評估，結果證明
AAV2.7m8-ChrimsonR-tdTomato在rd1小鼠中經玻璃體腔每眼注射7.84×10^9 vg具有良好的耐受性。但人類視網膜中對微生物視蛋白的潛在免疫反應是個重要問題，需要進一步研究。
Askou等［32］利用VEGF短發夾RNA（shRNA）與AAV8載體結合（scAAV2/8-hU6-sh9），經im給藥40 μL（每毫升2×10^10顆粒）治療的小鼠mVEGF表達下調91%，證明了內源性mVEGF的有效沉默。視網膜下遞送2 μL（每眼1×10^9顆粒）至激光誘導的CNV小鼠模型中，接受視網膜下給藥治療的CNV模型小鼠CNV面積顯著降低了48%。
1份病例數為30例的Ⅰ期臨床試驗，旨在評估單次玻璃體內注射ADVM-022在nAMD患者中的安全性、耐受性和有效性［33］。結果表明接受單次注射ADVM-022治療的濕性AMD患者能夠在22～46周內保持基準視力并改善中心視力，減少CNV滲出面積，恢復黃斑區視網膜厚度。試驗中80%患者經單次玻璃體腔給藥后，在長達92周內不需要任何補充性抗VEGF注射，平均年化抗VEGF注射頻率在ADVM-022后降低了99%（高劑量組每眼6×10^11 vg）和85%（低劑量組每眼2×10^11 vg）。ADVM-022治療期間僅出現輕度炎癥，而該癥狀在1～3個月后自行消退［3］。
RGX-314利用腺相關病毒8（AAV8）載體遞送抗VEGF fab轉基因。RGX-314的II期AAVIAT研究中展現出了積極結果，第1組20例患者脈絡膜上腔遞送RGX-314每眼2.5×10^11 GC，對照組每月玻璃體腔注射雷珠單抗0.5 mg，比例為3∶1。第2組20例患者脈絡膜上腔遞送每眼RGX-314 5×10^11GC，注射2次，對照組每月0.5 mg雷珠單抗玻璃體內注射，比例為3∶1。第3組與第2組劑量相同，對比RGX-314治療的20例中和抗體陽性患者。
結果顯示，第2組接受RGX-314的15例患者6個月內表現出穩定的最佳矯正視力（BCVA）和中央視網膜厚度（CRT），從第1天起6個月內BCVA平均變化為+0.2字母，CRT的平均變化為-33 μm。第1組與第2組的雷珠單抗治療的10例患者6個月內平均BCVA與基線比較變化了+4.0個字母，CR平均變化為-12 μm。與RGX-314治療前比較，平均年化注射率顯著降低，接受RGX-314治療6個月內平均注射1.3次，抗VEGF符合下降71.8%［34］。
1份持續3年的Ⅰ期和Ⅱa期聯合隨機對照試驗報告［35］中，24例基因治療患者接受1×1011 vg rAAV.sFLT-1并每月觀察持續1年，并按需進行補充治療。1～3年內，44%的患者單次治療維持基準視力，34%患者在單次治療后3年內保持顯著的視力改善，55%的患者在數次治療后視力得到改善，基因治療耐受性良好，除1例發生短暫性脈絡膜炎外，沒有發現嚴重的不良事件。該結果與32例病患的臨床隨機安全性試驗（NCT01494805）［36］相似，在該試驗中，基因治療組經視網膜下注射rAAV2-sFLT-1
1×10^11 vg，雷珠單抗作為陽性對照，在實驗開始時與第4周分別給予雷珠單抗治療，在52周的時間內，rAAV.sFLT-1組中有12例（57%）患者的視力保持或改善，而對照組為4例（36%），52%的基因治療患者接受≤2次治療即可顯著改善癥狀，并且無顯著不良反應；而對照組中，11例患者中有10例（90.9%）接受了超過2次雷珠單抗再治療。但鑒于樣本量較少，需進一步的臨床試驗來證明rAAV2-sFLT-1治療濕性AMD的可行性。
首次I/II期臨床研究（NCT03846193）已取得初步結果，研究將11例受試者在視網膜下分別給予2×10^10、5×10^10、2×10^11 vg 3個劑量，在隨訪51.8周內，3個劑量水平的GT005均具有良好的耐受性，僅發生輕微不良反應，且不良反應與GT005無關，無嚴重的眼部不良反應發生［16］。目前，2項Ⅰ/Ⅱ期臨床研究（NCT04437368、NCT04566445）正在招募志愿者，以評估2種劑量的GT005單次視網膜下注射對繼發于年齡相關性黃斑變性的地圖狀萎縮受試者的安全性和有效性。1項3年的長期隨訪試驗（NCT05481827）預計于2028年9月完成。
RetinoStat?是表達血管生成抑制劑血管抑素和內皮抑素的重組馬傳染性貧血慢病毒［37］。這類基因表達后能潛在地抑制抗VEGF治療不足的濕性AMD患者的血管生成［38］。恒河猴和家兔的動物模型表明視網膜下給藥是安全的，并且能在眼內長時間表達［39-40］。1項RetinoStat?的Ⅰ期劑量遞增臨床試驗中，21例患者被分為3組，分別給予低、中、高3個劑量，除了首次給藥時出現血管滲漏，3組患者均表現出良好的耐受性，沒有與藥物或手術相關的不良事件或嚴重不良事件，相比治療前，所有患者視力顯著改善，血管滲漏顯著減少，并且可實現基因穩定、長期（4年以上）表達［38］。
Campochiaro等［41］的研究印證了該藥的藥效與安全性，21例患有晚期濕性AMD的受試者分為3組，視網膜下分別給予3種劑量（2.4×10^4、2.4×10^5、8.0×10^5 TU），給藥后48周內觀察不良反應、視力變化以及視網膜結構改變。
結果表明，除1例術中嚴重不良反應和2例中度不良反應外，其他受試者沒有任何炎癥發生或炎癥輕微和短暫。中、高劑量組第1周即可測得眼內低水平內皮抑素，低劑量組在4周亦可測得血管抑素和內皮抑素。表達水平在給藥24周達到峰值，48周時維持穩定。第48周時，低劑量組2例患出現視力下降，中劑量組所有患者視力保持穩定，高劑量組除1例改善不明顯外，其余患者視力均顯著改善；低劑量組中的3例受試者中有2例顯示BCVA降低，而中劑量組中的受試者幾乎沒有變化。高劑量組受試者顯示BCVA改善了≥10個字母。熒光素血管造影滲漏明顯減少，長期隨訪顯示在給藥2.5年后仍有表達，可在少數患者體內維持4年。
血小板衍生生長因子（PDGF）抑制劑通過阻斷周細胞的募集、存活和成熟，抑制新形成血管的發育和成熟，從而為新生血管性AMD患者提供令人興奮的新治療選擇。抗VEGF單一療法已被證明對AMD的治療有效，然而，在大多數臨床試驗中，2/3的患者接受抗VEGF治療未能達到預期效果。2013年的1項研究［42］首先在動物體內進行，比較了VEGF抑制劑和PDGF抑制劑聯合治療與VEGF抑制劑單獨治療的效果，試驗結果顯示聯合用藥的益處，接受ip 1 mg·kg-1·d-1抗PDGF-BB-設計錨蛋白重復蛋白（DARPins）和1 mg·kg-1·d-1抗VEGF-A DARPins的小鼠眼底CNV顯著減少，且治療效果優于單一藥物。在Vldlr-/-小鼠模型中，經玻璃體腔注射的給藥方式也取得了相似的試驗結果，同時研究發現聯合治療的小鼠發生視網膜脫離的頻率和嚴重程度低于單獨治療的小鼠。
Ⅰ期臨床數據也充分證實了聯合用藥的優越性，其中，12例患者接受4種劑量（0.03、0.3、1.5、3.0 mg）的聯合治療，其余患者接受單一藥物治療［43］。結果表明聯合給藥的所有劑量都具有良好的耐受性，第12周59%的患者出現顯著的視力增益，BCVA增加15個字母，CNV大小較治療前平均減少了85%，CNV中心厚度平均減少了38.9%。CRT在基線時為395 μm，在第4周時為251 μm，在第8周時為231 μm，在第12周時為229 μm。這可能是因為VEGF、PDGF水平在新生血管中均升高，而VEGF被抗VEGF藥物所中和，PDGF持續產生作用，導致周圍細胞募集，新生血管膜穩定。將VEGF抑制劑與PDGF抑制劑聯合治療的策略，可能更有效治療新生血管生成。
Faricimab是第1個專為眼內使用而設計的雙特異性抗體，同時且獨立地結合、中和血管生成素-2（Ang-2）和VEGF-A，具有高特異性和效力，并且在2項Ⅱ期臨床中分別針對nAMD（NCT02484690）和糖尿病性黃斑水腫患者（NCT02699450）進行了評估，綜合2份試驗結果發現，每4周或每8周固定給藥間隔的法瑞西單抗（faricimab）在nAMD中的安全性和有效性與每月注射雷珠單抗相當，并具有持續療效的潛力［44-45］。
Arshad等［44］將72例受試者按1∶2∶2的比例分別以每4周0.5 mg的玻璃體內注射雷珠單抗或每12或16周6.0 mg的法瑞西單抗，結果發現在24周時，以16周為給藥間隔組中61%（19例）的患者無疾病活動，以12周為給藥間隔組中71%（17例）的患者無疾病活動，每4周給藥1次的雷珠單抗組中，94%（15例）的患者沒有疾病活動。第40周時，與雷珠單抗相比，每16周給藥1次和每12周給藥1次的法瑞西單抗治療，患者視力有所提高，BACV較基線提升了至少15個字母，光學相干斷層掃描結果顯示，減少的CNV面積與總病變面積與雷珠單抗治療相當。
3 結語
眼科基因治療背后的基本原理是將功能齊全的基因片段通過特定載體注入組織內，對細胞、組織內的脫氧核糖核酸進行基因修飾、基因替代、基因沉默，以達到預期的治療效果。而與其他器官相比，眼部具有更大的治療潛力，由于血-視網膜屏障，更易于通過注射手段獲得免疫豁免；眼部結構高度分隔有助于接觸不同的眼組織，透明的眼內介質允許通過非侵入式技術評估視網膜結構改變，以確認藥物的治療效果［37］。迄今為止，對于基因治療在AMD中潛在的應用研究已產生實質性結果，許多體內外研究已充分證實了基因治療對于AMD的有效性。
但基因治療效果受多種因素影響。在開發眼部給藥療法中，給藥途徑也是個重要因素，目前主流給藥方式主要為玻璃體腔給藥、視網膜下給藥。視網膜下腔給藥使病毒載體更易透過視網膜物理屏障，靶部位藥物濃度較高，然而，該方法需要專業的技巧，可能會產生短暫的醫源性視網膜脫落［46］，施術者必須小心控制，以降低手術風險，顳側血管弓上側進行給藥［47］，可以使藥液緩慢向黃斑中心凹擴散，將黃斑中心凹抬起，最大程度減少中心凹延展，減少視網膜脫落風險，盡管手術過程復雜且具有侵入性，但臨床試驗數據表明，視網膜下途徑通常具有良好的耐受性和有效性［48］。
由于內界膜作為物理屏障的存在，限制了遞藥系統向視網膜內層的轉導，玻璃體腔給藥操作難度較小，術后風險較小，但對于治療視網膜疾病療效較差，這可能是物理屏障、玻璃體的膠體性質導致藥物擴散不完全、載體的潛在稀釋所導致的。
AAV載體的視網膜下給藥是將治療基因遞送至視網膜的非常有效的方法，病毒載體的應用促進了正常基因在眼組織內的轉導，部分產品成功進入臨床試驗，并取得積極結果。但AAV作為當前最熱門的病毒載體也存在一定風險。2021年的1項持續時間10年的長期實驗發現，9只接受基因治療的犬中，2只犬的靶點基因表達逐漸增高，比前4年觀察到的水平高4倍［49］。盡管AAV基因治療中暫無基因表達增加或載體介導的嚴重不良事件，但實驗結果說明AAV載體可能具有潛在遺傳毒性，需要進一步治療后長期監測以評估該載體的安全性。未來隨著更安全和更有效的病毒載體的開發，靶向性的改善使載體更具細胞特異性，通過啟動子調控轉基因表達的改善，以及外科治療的進步以減少細胞損失，基因治療AMD的未來顯示出巨大的潛力，有望成為有效的療法。
利益沖突 所有作者均聲明不存在利益沖突
參考文獻（略）
來 源：張鵬，孟永，謝金華，劉楚喬，熊亞妮，常艷．年齡相關性黃斑變性基因治療的藥理與臨床研究進展 [J]. 藥物評價研究, 2023, 46(4): 897-904 .
